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文
摘
要
Ø 底物浓度（[S]）对酶促反应速度的影响 Ø pH对酶促反应速度的影响 Ø 温度对酶促反应速度的影响 Ø 酶浓度（[E]）对酶促反应速度的影响 Ø 激活剂对酶促反应速度的影响 Ø 抑制剂对酶促反应速度的影响 （一）[S]对酶促反应速度的影响和米氏方程 A、[S]对酶促反应速度的影响 1.当底物浓度较低时，反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。 3.当底物浓度高达一定程度，反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应。 B、米氏方程 1.米氏方程：1913. Michaelis 和 Menten推导出1925. Brigg 和Haldane提出“稳态假说” [S]：底物浓度 V：不同[S]时的反应速度 Vmax：最大反应速度 Ｋm：米氏常数 2.米氏方程的推导 米氏方程推导首先假设： Ø 测定的反应速度为初速度，此时产物P的生成极少（即P→0），因此P+E→ES的不考虑； Ø [S] 远远大于[Et] ，因此在反应的初始阶段，底物的浓度可认为不变(即[S]＝[St])。 Ø E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，[ES]可在很长时间内保持恒定，即“稳态”。 3.米氏常数的意义和测定 a.Km的意义： Ø 表示Km值是当反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。因此,米氏常数的单位为mol/L。 Ø 在一定条件下，不同的酶具有不同Km值，它是酶的一个重要的特征物理常数。 Ø 1/Km表示酶与底物之间的亲和程度：值大表示亲和程度大，酶的催化活性高。 b.Km的测定 Ø 双倒数做图法（Lineweaver-Burk） (二)pH对酶促反应速度的影响 1.最适pH:在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适pH。 2. pH的影响表现在： Ø 酶蛋白 Ø 活性中心基团 Ø 底物分子 （三）温度对酶促反应速度的影响 1.大多数酶都有一个最适温度。在最适温度条件下,酶促反应速度最大。 Ø 一方面是温度升高,酶促反应速度加快。 Ø 另一方面,温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降低甚至丧失。 （四）[E]对酶促反应速度的影响 Ø 当[S]>>[E]时，Vmax = k3 [E]。酶促反应的速度与酶浓度成正比。 （五）激活剂对酶促反应速度的影响 1.概念：凡是能提高酶活性的物质都称为激活剂。 2.种类： （2）简单有机化合物：GSH等—巯基酶。 （六）抑制剂对酶促反应速度的影响 A.概念：凡是使酶活性下降，但不引起酶蛋白变性失活的物质称该酶的抑制剂。 B.分类： 1.不可逆抑制作用：抑制剂与酶结合后不能用透析等方法除去抑制剂而恢复活性，这种抑制作用称为不可逆抑制。如：有机磷化合物：敌百虫、敌敌畏、农药1605等。与酶活性直接有关的丝氨酸上的-OH牢固地结合，从而抑制某些蛋白酶或酯酶。 2.可逆抑制作用： a.概念：抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性，这种抑制作用称为可逆抑制作用。 b.分类： Ø 竞争性可逆抑制 Ø 非竞争性可逆抑制 Ø 反竞争性可逆抑制 ①竞争性可逆抑制：某些抑制剂与底物结构极为相似，可与底物竟争与酶活性中心结合，当抑制剂与酶结合后，妨碍了底物与酶的结合，降低了酶的活性，这种抑制作用被称为竞争性可逆抑制。 竟争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底物的竞争能力来消除。 动力学： Vmax不变；Km值增加。 ②非竞争性可逆抑制：酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导致酶活性下降。由于这类物质并不和底物竞争与活性中心的结合，所以这种抑制作用称为非竞争性可逆抑制。 动力学：Vmax减小；Km不变。 ③反竞争性可逆抑制 动力学：Vmax减小；Km降低。
