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上个月,老师提到胶体金法?

我一个大博士,竟然不知道胶体金。这。。暴击三连。火速查看,结果不能流畅表述,那是暴击五联了吧。。作为刘家人,那可是大忌。

火速记录

胶体金法:

从以下几个方面进行介绍;

1.什么是胶体金

2.胶体金法能做什么

3.胶体金法的优缺点

正文:

胶体金:是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成的金颗粒。其由一个基础晶核(11个金原子形成的二十面体)和包围在外的双离子层构成(内层为负离子曾AuCl2-,外层是带正电荷的H+),如下左图所示(图片来源于2012/3/6-小分子研发中心第七次组内学术会议)。

由于静电作用,金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,胶体金的名字由此而来。

胶体金具有高电子密度,能与多种生物大分子结合,已成为免疫标记技术中继荧光素、放射性同位素和酶之后,较常用的一种非放射性示踪剂。

胶体金直径在1-100nm,能够均匀、稳定的分散在液体中,呈球形小颗粒或椭圆形大颗粒。

鉴于胶体金的表面呈现负电,能够与表面带正电荷的抗原、抗体通过静电作用进行相结合,并且这种结合不会破坏蛋白的结构和功能,如上右图所示。

胶体金能做什么?

自1972年,FaulK和Taylor首先将胶体金作为标记物引入免疫学研究,通常被称为免疫金标记。此后,大量的研究均表明胶体金可以稳定且迅速的吸附蛋白质,而这种吸附不会导致蛋白质生物活性的改变。

胶体金可作为探针进行细胞内多糖、多肽、抗原、激素、核酸等生物大分子的精确定位,也经常被用于常规的免疫诊断。

目前胶体金法在新冠病毒和妇女怀孕检测中被广泛应用。大部分的人对胶体金法的熟知可能源于对新冠的检测。新型冠状病毒抗原检测试剂(胶体金法)是一种体外免疫层析检测法,以胶体金为示踪物,检测受检者的血清样本中是否存在新型冠状病毒的抗体。

具体操作如下

将受试者的血清样品滴在样品垫上,样品在毛细作用下,从左向右移动。若样品中存在新型冠状病毒的抗体IgG,则IgG将会与结合垫上胶体金标记的新冠病毒抗原结合,并继续向右移动,并在检测线处与鼠抗人IgG抗体结合。由于鼠抗人IgG被吸附在检查测线上,因此胶体金在此处沉淀聚焦显现为红色。如下所示(图片来自于bilibili UP主佳朵)。

同时在质控线处,胶体金标记的鼠IgG与羊抗鼠IgG抗体结合,胶体金在质控线处聚集沉淀而显现为红色。

若受试者检测后,在检测线和质控线处都有条带,则说明检测者为新冠阳性。当在检测线处未观察到条带时,为阴性。若检测线和质控线均无条带,或检测线有条带而质控线无条带,说明试剂盒有问题,应进行更换。具体条带对应的结构可参考下图。

胶体金法新冠检测后,结果对比

胶体金的优缺点是什么呢?

胶体金法进行新冠病毒检测,简单,易操作,并且速度快,成本也不高,为何没有作为普及的检测方法。

这需要提及到胶体金法进行新冠检测的缺点。检测灵敏度低,容易出现假阴性,也就是感染者没测出来。

根据官方报道,新冠阳性患者采用胶体金法IgG进行检测,检出率只有70%,剩下的30%无法检出。

因此国家药品监督管理局明确指出:

胶体金法检测试剂盒产品”仅用作对新型冠状病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标,或疑似病例诊断中与核酸检测协同使用,不作为新型冠状病毒感染的肺炎确诊和排除依据,不适用于一般人群的筛查,仅限于医疗机构使用。“

今日在分享的过程中遇到的问题。

胶体金能够形成均匀、分散的胶体状态,那么问题来了,什么是胶体状态?

胶体(colloid)是指一种不溶解的物质微粒在另一种物质中的分散和悬浮状态。如下图的耶稣光,也是由于胶体中分散的粒子导致的。

耶稣光(胶体中分散质粒子直径比可见光波长要短,入射光的电磁波使颗粒中的电子做与入射光波同频率的强迫振动,致使颗粒本身如一个新光源,向各方向发出与入射光同频率的光波。)

未来将与大家分享胶体金为何带负电?胶体金作为探针如何对细胞内或者细胞表面的大分子进行精确定位(具体案例分析)?胶体金带负电可吸附蛋白,这种吸附是否有结构偏好性?胶体金法的未来市场如何?

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