本
文
摘
要
无菌空气系统是发酵系统中至关重要的一部分，在发酵罐染菌排除工作中，怎么样来排除空气系统本身的故障有时候就会成为必须要做的工作。
城市空气中含菌量：103~104个/m3
种类：酵母、霉菌、放线菌和噬菌体
北方>南方
高处<低处，采风口高于10m
农村<城市
无菌空气的检查是发酵工业必需的工作内容，但要准确地测定无菌空气中的含菌量有一定的困难。常用的检测方法：光学法和肉汤培养基测定法
1.光学检查法
利用微粒对光线的散射作用来测量空气中粒子的大小和数量（不是活菌数）。测量时以一定的速度将试样空气通过检测区，同时用聚光透镜将光源束射入检测区。通过仪器检测空气中的0.5~5μm微粒的浓度。通过空气中的微粒浓度来衡量杂菌量。
2.肉汤培养基检查法
1.进气口，2出气口，6中为肉汤培养基4，要在液面以下
肉汤培养基：0.5% 牛肉膏，1.0%的蛋白胨、0.5%的氯化钠，pH7.0-7.4,121℃灭菌30min。
使用方法：取经过滤空气从1口进入，连续取样数小时或十几小时，然后在37℃下培养16h，出现浑浊则表明空气中有菌。
沉降法测定空气中微生物含量的方法
培养基
牛肉蛋白胨培养基配方：牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g，NaCl5g,水1000ml，pH7.2~7.4
马铃薯培养基配方： 马铃薯200g,蔗糖20g,水1000ml，pH7.2
高氏一号培养基配方：淀粉20g,硝酸钾1.0g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,水1000ml,pH7.2~7.42.
实验方法
1．倒平板：按常法配置上述培养基，分装于三角瓶中，高压灭菌备用。临用前将培养基熔化，冷却至50℃左右，各倒16个平板备用。
2．暴露取样
在指定的地点草地，一层楼，三层楼，七层楼各放4皿，将平板皿盖打开，在空气中暴露5min和10min,时间一到，立即合上皿盖。
3．培养观察：细菌置于37℃培养，放线菌培养基平板和真菌培养基平板置于28℃培养。细菌培养48h，真菌和放线菌培养4-6天。计数平板上的菌落，观察各种菌落的形态、大小、颜色等特征。
4.计算1m3空气中微生物的数目
如面积为100㎝2的平板培养基，暴露在空气中5分钟，置于37℃培养24小时后所生长的菌落数，相当于10L空气中的细菌数。
X：每m3空气中的细菌数
N：平板暴露5分钟，置37℃培养24小时后生长的菌落数
r：平皿底半径（㎝）
