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乌梅中草药治什么病(乌梅的功效)

张远达 陈志强* 尚静雪 蔡小利 张鹏举 付丽云 李海华

( 内蒙古华天制药有限公司,内蒙古赤峰市,024070)

摘要:目的:建立乌梅颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)对乌梅、黄连进行鉴别;用高效液相色谱法测定乌梅颗粒中枸橼酸的含量。色谱条件为Silgreen C18(4.6mm×250mm,5um)色谱柱;流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢铵溶液(3:97)(用磷酸调节pH值至3.0);检测波长为210nm;流速为0.6ml/min;柱温为室温。结果:建立了乌梅、黄连的薄层色谱定性鉴别的方法;建立了HPLC测定乌梅颗粒中枸橼酸含量的方法。结论:建立的乌梅颗粒鉴别及枸橼酸含量测定方法简单、易于操作、准确度高、重现性好,可用于乌梅颗粒的质量控制。

Study on quality standard of Chinese veterinary medicine wumei granule

ZHANG Yuanda,CHEN Zhiqiang *,SHANG Jing xue,CAI Xiaoli,

ZHANG Pengju,FU Liyun,LI Haihua

(Inner Mongolia huatian pharmaceutical co., LTD., chifeng city, Inner Mongolia, 024070)

Abstract: objective: to establish the quality standard of wumei granules. Methods: thin layer chromatography (TLC) was used to identify the black plum and coptis chinensis. The content of citric acid in wumei granules was determined by HPLC. The chromatographic condition was Silgreen C18 (4.6mm 250mm, 5um) column. The mobile phase was acetonitrile-0.5% ammonium dihydrogen phosphate solution (3:97) (pH value adjusted by phosphoric acid to 3.0). The detection wavelength was 210nm. The flow rate was 0.6ml/min. The column temperature is room temperature. Results: a TLC method for the qualitative identification of fructus mume and rhizoma coptidis was established. HPLC method for determination of citric acid in wumei granules was established. Conclusion: the method is simple, easy to operate, accurate and reproducible. It can be used for quality control of wumei granules.

Keywords: wumei granules; Citrate; Thin layer chromatography; High performance liquid chromatography

乌梅颗粒由乌梅、柿饼、黄连、姜黄、诃子组成。原方乌梅散收载于《中国兽药典》二部[1],临床应用于治疗幼畜奶泻。但由于散剂服用剂量大,服用不便,且药材中的有效成分不易溶出,吸收差[2]。故对乌梅散进行工艺研究将其制成颗粒剂。为控制乌梅颗粒的质量,本文对其进行质量研究,复方中乌梅为制剂的君药,含有大量的有机酸,现代药理研究表明,乌梅的抗菌和固涩作用与有机酸密切相关[4],因此将有机酸中含量最高的柠檬酸作为复方的有效成分之一。本研究建立了高效液相色谱法测定乌梅颗粒复方中柠檬酸的含量,并在保留原方中黄连的鉴别方法基础上又增加了乌梅的薄层色谱法进行定性鉴别。实验证明,该方法简便、准确,为乌梅颗粒的质量控制提供了依据。

LC-2010CHT高效液相色谱仪(日本岛津公司);集热式磁力加热搅拌器(型号为DF-101S) ,金坛市瑞华仪器有限公司生产;旋转蒸发仪(型号为RE52-99) 、循环水式真空泵(型号为SHZ-

基金项目:2018年内蒙古科技重大项目(无编号)。

*通讯作者:陈志强( 1973 - ) ,男,内蒙古赤峰市人,中级兽医师,硕士研究生,研究方向为新产品开发,zhq_chen@ 163. com.

Ⅲ) ,上海亚荣生化仪器厂生产;电子天平(BT25S);青岛海洋化工厂硅胶G薄层板。

乌梅颗粒:批 号:180601-180607,来源:内蒙古华天制药有限公司研制。乌梅对照药材:规格:5g;批号:121208-201506;供TLC含量测定比色检查用,使用前不需 要干燥处理;来源:中国食品药品检定研究院。黄连对照药材:规格:1g;批号: Z0010704;供TLC含量测定比色检查用,使用前不需要干燥处理;来源:中国兽医药品监察所。 盐酸小檗碱对照品:规格:30mg;批号: 110713-201613;含量:86.8%;来源:中国食品药品检定研究院。

2.1薄层色谱鉴别

2.1.1阴性对照溶液制备 根据处方去除各味药,按制剂工艺制成相应阴性对照,并按各自供试品溶液制备方法制成相应溶液,即得[3]。

2.1.2乌梅薄层色谱鉴别 取乌梅颗粒样品粉末20g,加甲醇30ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml使溶解,加乙醚振摇提取2次,每次20ml,合并乙醚液,蒸干,残渣用石油醚(30~60℃)浸泡2次,每次15ml(浸泡约2分钟),倾去石油醚,残渣加无水乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取乌梅对照药材5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液10ul和对照药材溶液5µl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环已烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(20:5:8:0.1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。结果见图1 -+。由图可知,供试品色谱在与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点,特征性强,阴性无干扰。

2.1.3黄连薄层色谱鉴别 取乌梅颗粒样品0.5g,加甲醇10ml,超声15分钟,滤过,滤液浓缩至5ml,作为供试品溶液。另取黄连对照药材50mg,加甲醇5ml,超声15分钟,滤过,滤液作为对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各2ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(6:3:1.5:1.5:0.3)为展开剂,置氨蒸汽饱和的展开缸内,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同的黄色荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上,显相同的一个黄色荧光斑点。结果见图2。由图可知,供试品色谱在与各对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点,特征性强,阴性无干扰。

2.2 HPLC定量测定

2.2.1 色谱条件 Silgreen C18色谱柱(4.6mm×250mm,5um);流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢铵溶液(3: 97)(用磷酸调节pH值至3.0);检测波长为210nm;流速为0.6 ml/min;柱温为30℃。含量测定结果采用外标法计算。

2.2.2 对照品溶液的制备 取枸橼酸对照品适量,精密称定,加水制成每1ml含0.5mg的溶液,即得。

2.2.3 供试品溶液制备 取本品约1g,精密称定,精密加入水50m L,称定重量,加热回流1h,放冷,再称定重量,用水补足减失的质量,过滤,取上清液,即得。

2.2.4.1 专属性考察 如图3所示,阴性对照在对照品相同保留时间处未出现对应色谱峰,表明阴性无干扰。

图3

2.2.4.2 线性关系考察

精密量取枸橼酸对照品溶液10m L,置于50 m L量瓶中混匀,用水定容至刻度,再将其倍半稀释为6个质量浓度,在“2. 2. 1”项色谱条件下进样测定。以峰面积为纵坐标 (Y) ,质量浓度为横坐标(X)进行线性回归,结果见表1,可知各成分在各自范围内线性关系良好。

表1枸橼酸线性关系

峰面积回归方程r线性范围(ug~mL-1) 1123y = 39854x – 803000.9994 0.15-1.41 39902 76380 117589 158673 200598

2.2.4.3 稳定性试验

取供试品溶液(批号180601),于0、2、4、8、10、12 h、24h 在 “2.2. 1”项色谱条件下进样10ul测定,测得枸橼酸面积RSD分别为0.40%、0.57%、0.82%、0.91%、2.35%、2.91%,表明供试品溶液在12 h 内稳定性良好。

2.2.4.4 精密度试验

精密吸取供试品溶液(批号180601)10ul,在“2.2.1”项色谱条件下进样测定6次,测得枸橼酸面积RSD分别为0.31% 、0. 96% 、0.22% 、0.12% 、0.68% ,表明仪器精密度良好。

取样品(批号180601)6份,按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液,在“2.2.1”项色谱条件下进样10ul测定,测得枸橼酸含量RSD分别为0.40%、0.89%、0.33%、1.09%、1.15%,表明该方法重复性良好。

2.2.4.6 加样回收率试验

精密量取“2. 2. 2”项下含量已知的枸橼酸对照品溶液10ml,置于500mL量瓶中,水稀释至刻度。精密称取样品(批号180601)6份,每份约1.0g,精密加入50 m L上述对照品溶液,在“2.2.1 ”项色谱条件下进样测定,计算回收率。结果,枸橼酸分别为97. 02%、100. 21%、101. 33%、99. 03%、98. 15%,RSD分别为2. 28%、2. 86%、 2. 05%、1.66%、2.95%。

取6批样品,按上述“2.2.3”项下方法测定含量,结果分别为0.18%、0.16%、0.14%、0.14%、0.12%、0.15%,可知6批样品枸橼酸平均含量为0.15%。

乌梅所含的有机酸中,含量最高是枸橼酸和苹果酸,二者含量高低与乌梅成熟程度密切相关,乌梅未成熟时苹果酸含量较高,成熟后枸橼酸含量最高,因此研究将枸橼酸作为复方质量控制指标[10]。

乌梅颗粒作为由5味药材组成的复方制剂,原标准仅以其中一味药的薄层色谱定性鉴别作为其质量控制依据,为进一步完成检测的精密度准确性故本实验增加了TLC、HPLC 法检测完善了质量标准。在TLC定性鉴别中,本实验不仅保留原标准黄连的鉴别方法,而且增加了乌梅的鉴别及含量测定方法。

本研究在薄层色谱定性鉴别测定过程中,黄连依据原标准检测结果符合规定,新增乌梅鉴别方法应用2015版《中国兽药典》中乌梅鉴别的基本方法,结果拟定喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色,置紫外光灯(365nm)下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

乌梅颗粒中乌梅的枸橼酸含量测定过程中,应用2015版《中国兽药典》中乌梅含量测定的基本方法,但由于乌梅颗粒是由5味中药组成的复方,其成分复杂,测定时干扰严重,故本研究将检测流速设定为0.6ml/min,并通过方法学研究对其专属性、线性、稳定性、精密度、重复性和加样回收率进行考察,最终对样品测定其6批平均值为0.15%,最小值为0.12%。

对乌梅药材的质量标准研究较多,而对乌梅颗粒复方的质量标准研究很少,本研究建立了乌梅颗粒复方中乌梅的薄层鉴别方法和枸橼酸的含量测定方法,本法准确、灵敏、重复性好,为乌梅颗粒复方制剂的质量控制提供了依据。

参考文献:

中国兽药药典委员会编.中华人民共和国兽药典2015年版[S].

China veterinary pharmacopoeia committee. Veterinary pharmacopoeia of the People’s Republic of China, 2015 edition [S].

王智云,孙玉刚,马正云,等.乌梅散颗粒的质量标准研究[J].中国煤炭工业医学杂志, 2014,

17(04): 638-641.

wang zhiyun, sun yugang, ma zhengyun, et al. Study on quality standard of wumeisan granules [J]. China journal of coal industry medicine, 2014,17 (4) : 638-641.

尚静雪,陈志强,张远达,等.乌梅颗粒制备工艺研究[J].中国兽药杂志,2019,53(02):33-39.

Shang J x, Chen z q, zhang y d, et al. Study on preparation technology of wumei granules [J]. Chinese journal of veterinary medicine,2019,53(02):33-39.

陈战国,吕九如.复方制剂“稚泻停口服液”中柠檬酸的RP-HPLC测定研究[J].中草

药,2000(12):900-902.

Chen zhanguo, lu jiuru. Rp-hplc determination of citric acid in compound preparation zhixieting oral liquid [J]. Chinese herbal medicine,2000(12):900-902.

张华月,李琦,付晓伶.乌梅化学成分及药理作用研究进展[J].上海中医药杂志,2017,51(S1):296-300.

Zhang huayue, li qi, fu xiaoling. Research progress on chemical constituents and pharmacological effects of ume [J]. Shanghai journal of traditional Chinese medicine,2017,51(S1):296-300.

邓婉婷. 乌梅各组分生物活性研究及提取工艺优化[D].广东药学院,2015.

Deng wenting. Study on the biological activity of various components of ume and optimization of extraction process [D]. Guangdong pharmaceutical university,2015.

肖小河,鄢丹,马丽娜,等.中药现代化研究近十年概论[J].中国现代中药,2012,14(1):7-12,46.

Xiao xiaohe, yan Dan, ma lina, et al. Research on modernization of traditional Chinese medicine in recent ten years [J]. China modern traditional Chinese medicine,2012,14(1):7-12,46.

[8] 刘红宁,王玉蓉,陈丽华,等.中药药剂学研究进展与发展思路[J].世 界中医药,2015,0 (3):305-309,314.

Liu hongning, wang yurong, Chen lihua, et al. Research progress and development ideas of pharmacy of traditional Chinese medicine [J]. World journal of traditional Chinese medicine,2015,0 (3):305-309,314.

杨燕,田成旺.现代中药发展的几个关键问题[J].中草药,2016,47( 18): 3346-3350.

Yang yan, tian chengwang. Several key issues in the development of modern Chinese medicine [J]. Chinese herbal medicine,2016,47(18): 3346-3350.

[10] 陈琳,刘丽梅,王瑞海,等.高效液相色谱法测定乌梅丸中柠檬酸的含量[J].中国实验方剂学杂

志,2010,16(01):30-31.

Chen l, liu l m, wang r h, et al. Determination of citric acid in wumei pills by high performance liquid chromatography [J]. Chinese journal of experimental formulationsTzu chi, 2010 (01) : 30 and 31.

王璐,张红宇,王莉.乌梅及其不同炮制品的药理作用比较[J].中药材,2010,33(03):353-356.

Wang lu, zhang hongyu, wang li. Comparison of pharmacological effects of black plum and its different processed products [J]. Chinese medicinal materials,2010,33(03):353-356.

高媛媛. 中兽药丹连花子宫灌注液的质量标准研究[D].西北农林科技大学,2015.

Gao yuanyuan. Study on the quality standard of Chinese veterinary medicine Dan lian hua uterus infusion [D]. Northwest university of agriculture and forestry science and technology,2015.

王婧.乌梅薄层色谱鉴别分析方法综述[J].内蒙古中医药,2016,35(09):133-134.

Wang jing. Review of TLC methods for identification and *** ysis of black plum [J]. Inner Mongolia journal of traditional Chinese medicine,2016,35(09):133-134.

吴进,李志浩, *** .高效液相色谱法测定喉痛片中枸橼酸的含量[J].山西医药杂志,2015,44(18):2167-2169.

Wu jin, li zhihao, li peng. Determination of citric acid in huatong tablets by HPLC [J]. Shanxi medical journal,2015,44(18):2167-2169.

张素娟.食品中柠檬酸的检测方法研究进展[J].食品工业科技,2011,32(01):352-354.

Zhang su Juan. Research progress on detection methods of citric acid in food [J]. Food industry science and technology,2011,32(01):352-354.

王婵,韦刃,黄晓玉,林广,黄志权,周永强.用高效液相色谱法测定银翘散配方颗粒中连翘酯苷A的含量[J].药学实践杂志,2015,33(02):156-158.

Wang chan, wei ren, huang xiaoyu, Lin guang, huang zhiquan, zhou yongqiang. Determination of forsythioside A in yinqiao powder formula granules by HPLC [J]. Journal of pharmaceutical practice,2015,33(02):156-158.

樊惠民,余实,谭远方.食品中柠檬酸的检测[J].食品安全质量检测学报,2011,2(04):205-208.

Fan huimin, yu shi, tan yuanfang. Detection of citric acid in food [J]. Journal of food safety and quality detection,2011,2(04):205-208.

彭悦云,朱文涛,张庆莲,张晓芳,徐超群.乌梅中柠檬酸的测定和提取工艺的优化[J].华西药学杂志,2011,26(01):59-61.

Peng yueyun, zhu wentao, zhang qinglian, zhang xiaofang, xu chaoqun. Determination and extraction

process optimization of citric acid in black plum [J]. Chinese journal of pharmacy,2011,26(01):59-61.

王永军,王敏,王淑华.高效液相色谱法测定柠檬酸的含量[J].河北化工,2006(07):46-

Wang yongjun, wang min, wang shuhua. Determination of citric acid content by high performance liquid chromatography [J]. Hebei chemical industry,2006(07):46-49.

唐慧慧,蔡清宇,毛翼.HPLC法测定净乌梅及乌梅炭中柠檬酸和苹果酸的含量[J].中药材,2007(01):52-54.

Tang huihui, CAI qingyu, MAO yi.HPLC method for determination of citric acid and malic acid in the charcoal of pure black plum and black plum [J]. Chinese medicinal materials,2007(01):52-54.

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