羟自由基测定试剂盒（检测羟基自由基的试剂）

【Boxbio】羟自由基清除能力检测试剂盒（货号：AKAO013）

一、产品描述

羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，是造成组织脂质过氧化、蛋白质解聚、核酸裂解、多糖解聚的重要活性氧，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱，羟自由基清除能力是抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。

H2O2/Fe2+通过Fenton反应产生羟自由基，将邻二氮菲-Fe2+水溶液中Fe2+氧化为Fe3+，导致536 nm处吸光值下降，根据吸光值下降速率即可反映样品清除羟自由基的能力。

二、产品内容

名称试剂规格储存条件使用方法及注意事项提取液液体55 mL×1瓶4℃保存-试剂一液体10 mL×1瓶4℃避光保存-试剂二液体20 mL×1瓶4℃保存-试剂三液体20 mL×1瓶4℃保存-试剂四液体100 μL×1瓶4℃避光保存使用前加入9.9 mL蒸馏水充分混匀（可按比例现用现配，配置后4℃可保存一周）

三、产品使用说明

测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿（光径10 mm）、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴和蒸馏水。

1.样品处理（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）

①组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1 g组织，加入1 mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 10000 g离心10 min，取上清置于冰上待测。

②血清、培养液等液体样品：直接测定或适当稀释后再进行检测。

③提取物（或药物）配置为一定浓度后检测（如1 mg/mL）。

2.测定步骤

①分光光度计预热30 min以上，调节波长至536 nm，蒸馏水调零。

②在离心管中依次加入下列试剂

试剂测定管（μL）对照管（μL）空白管（μL）试剂一150150150试剂二300300300试剂三300300300立即混匀，防止局部颜色过重待测样本150--试剂四150150-蒸馏水450600750充分混匀，37℃反应60 min10000 g常温离心10 min，取上清

吸光值测定：取1 mL离心上清液于1 mL玻璃比色皿中，测定536 nm处吸光值，记为A测定、A对照和A空白，计算∆A测定=A测定-A对照，∆A空白=A空白-A对照。注：对照管和空白管只需测定1-2次。

四、注意事项

①为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品须加入等量的样品，血清、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓度；

②若测定样本较多时，可按试剂一：试剂二：试剂三=0.15:0.3:0.3的体积比配置为工作液，根据使用量现用现配；

③为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.