本
文
摘
要
作为实验室中比较常见的两款测量工具,酶标仪与分光光度计的测量原理是相同的,都是利用朗伯-比耳定律,测定的都是样本的吸光度。那这两者之间有什么区别呢,接下来小编通过光路长度、光路方向以及盛装待测溶液的容器三方面为大家区分一下。
1、光路长度:由于光密度与吸光系数,待测组分浓度以及光路长度成正比。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm,因此不同仪器不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。
2、光路方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。
3、盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。
文章的结尾,让我们来看一下酶标仪的优缺点:
优点:一次性处理样品量大,且操作简单,重复性好,检测速度快、效率高。
缺点:须确保微孔板每个孔加样量严格一致,对实验者的操作技能提出了更高的要求,此外,96孔板在紫外光区有较强的紫外吸收,应尽量避免在300nm以下使用酶标仪进行含量测定。
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