PCR的原理和操作（pcr的原理及操作过程）

PCR又称聚合酶链式反应，PCR的过程可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。

PCR的三个步骤分别是1.高温变性:利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，；2.低温退火:低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合；3.中温延伸:当调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5-3)的方向合成互补链。

基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。它需要DNA模板，上下游引物，taqDNA聚合酶，dNTP以及缓冲液(镁离子很重要)，当然还有超纯水。

当然现在实验室做PCR，买的缓冲液里面是直接加好聚合酶和dNTP的，可以直接用。

一般的25微升体系里DNA模板和上下游引物各1微升，PCR MIX12.5微升，ddH2O9.5微升。