本
文
摘
要
ABO、RhD血型定型检测卡,简称为正反定型卡,前三个孔分别填充了IgM抗-A、抗-B及抗-D试剂,为特异性性凝胶试剂孔,用于ABO血型正定型以及RhD抗原的检测,后三个孔只填充有凝胶及缓冲液,无特异性抗体试剂,为中性胶孔,用于阴性对照及ABO血型反定型检测。
后三孔实际上只是提供了一个微柱凝胶介质的反应环境,类似于我们试管法所用的试管,只是一个方法学载体,可以根据实际需要,进行不同的试验操作。其中阴性对照孔根据验证的目的不同,有三种做法,下面做一一介绍。
1、对照孔只加待检标本红细胞悬液,做标本红细胞阴性对照。
目的:验证患者红细胞在体内有没有被IgM抗体致敏,常见自身抗体。
分析:对照孔阳性,说明标本红细胞在室温、盐水环境下自凝,正定型结果会受影响,正定一般呈AB型,正定型结果不可靠。
处理:可进行热放散或者使用巯基乙醇(2Me)、二硫苏糖醇(DTT)处理红细胞,放散掉或破坏掉红细胞表面结合的IgM抗体,复查正定型,从而得到正确的结果。
2、对照孔加反定型试剂盒中O型红细胞+标本血浆,做标本血浆阴性对照。
目的:检测患者血浆中有无室温反应其他(ABO以外)抗体,干扰反定型。
分析:对照孔阳性,说明患者血浆中有室温反应的ABO以外的抗体,则会干扰反定型试验结果,反定型常见O型,且Ac和Bc孔凝集强度差异≥2+,反定型结果不可靠。
处理:可做盐水抗筛,确定ABO以外盐水抗体干扰,结合正定型结果,O细胞凝集强度,反定型凝集强度分析,忽略反定型凝集强度与O细胞相同的抗体。进一步可进行O细胞室温吸收,去除ABO以外抗体干扰,复查血浆反定型,得出正确结果。
3、对照孔加待检标本红细胞悬液+自身血浆,做盐水自身对照。
目的:检测有无自身抗体。
分析:自身对照阳性,怀疑含有自身抗体,正反定型结果均会受影响,常见自身对照阳性结果为卡片六孔全阳,正反定型结果均不可靠。
处理:区分处理,单独再做红细胞对照及血浆对照,区分红细胞自凝或血浆自身抗体,或两者兼有。使用1、2所用方法,分别处理红细胞和血浆,使用处理过的红细胞和血浆分别做正定型及反定型,得出正确结果。
以上就是常见的正反定型对照的三种做法,以及遇到各自阳性的简单处理方法。顺带解释了很多老师的疑问:反定型试剂盒O细胞有什么用?可以作为对照孔对血浆进行阴性对照。
总结一下,对照怎么做都可以,看您的目的是质控红细胞还是血浆,或者是担心自身抗体对结果的干扰。只加红细胞操作简单,是常规推荐的,但在实际使用过程中,发现血浆意外抗体干扰反定型发生概率更多一些,做O细胞对照有利于及时发现处理。