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革兰氏染色实验报告(革兰氏染色的实验分析)

一、革兰氏染色的原理

1、G+细胞壁主要由肽聚糖形成的致密网状结构组成,壁厚,类脂含量低,交联度高,用乙醇处理后,发生脱水作用,肽聚糖层孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留再细胞内,故细菌仍保留初染时的紫色。

2、G-肽聚糖层较薄,交联度低,含较多类脂质,故用乙醇处理后,类脂质被溶解,细胞壁孔径变大,通透性增加,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,细胞被脱色,经沙黄复染后呈红色。

二、革兰氏染色的步骤

1、制片

涂片——干燥——固定

2、初染

滴加结晶紫染色1~2分钟,水洗;

3、媒染

用碘液冲去残水,并用碘液覆盖1分钟;

4、脱色

滴加95%酒精,脱色30秒,立即水洗;

5、复染

用番红液复染1~2分钟,水洗;

6、镜检

干燥后,用油镜观察。先低倍镜再高倍镜。油镜使用结束后,要及时用擦镜纸擦干净镜头,避免香柏油残留。

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